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高效液相色谱仪的使用注意事项及维护
来源:三门峡仪表厂 日期:2025-3-24
高效液相色谱仪(HPLC)是一种重要的分析仪器,广泛应用于化学、制药、环境等领域。正确的使用和维护对于保证分析结果的准确性、延长仪器使用寿命至关重要。以下是使用注意事项及维护方法:
使用前的准备
流动相准备:使用高纯度的溶剂,如色谱纯或更高纯度级别,确保流动相的质量。水相需使用超纯水,并通过 0.45μm 或更小孔径的滤膜过滤,以去除杂质。有机相也应过滤。流动相使用前需进行脱气处理,可采用在线脱气机、超声脱气(15-30 分钟)等方法,防止气泡进入系统影响分析结果。
样品准备:确保样品完全溶解且无固体颗粒,使用 0.45μm 或更小孔径的滤膜过滤样品,防止堵塞色谱柱和流路系统。如果样品浓度过高,需进行适当稀释,以避免进样量过大导致色谱峰变形或过载。
使用过程中的注意事项
系统压力:密切关注系统压力,避免压力过高或过低。压力过高可能是由于色谱柱堵塞、流动相粘度大或流速过快等原因导致;压力过低可能是由于流动相泄漏、泵故障或进样器问题等引起。在改变流动相组成或流速时,应缓慢进行,以防止压力波动过大对系统造成损害。
流速控制:按照色谱柱的使用说明设置合适的流速,避免流速过高损坏色谱柱或导致分离效果不佳。在更换色谱柱或流动相后,应重新调整流速并进行系统平衡。
温度控制:如果需要控制柱温,应根据色谱柱的要求设置合适的温度。温度变化可能会影响色谱峰的保留时间和分离效果,因此在分析过程中应保持柱温稳定。
进样操作:进样前确保进样器干净,避免交叉污染。按照进样器的操作说明进行进样,注意进样量的准确性。进样后及时清洗进样器,防止残留样品对后续分析产生影响。
使用后的维护
色谱柱维护:分析结束后,需对色谱柱进行冲洗。如果使用的是反相色谱柱,通常先用高比例水相(如 90% 水 - 10% 有机相)冲洗 30 分钟以上,以去除缓冲盐和杂质,然后用高比例有机相(如 90% 有机相 - 10% 水相)冲洗 30 分钟以上,最后用纯有机相冲洗并保存。对于正相色谱柱,应使用相应的正相溶剂进行冲洗和保存。
流路系统清洗:用合适的溶剂冲洗整个流路系统,去除残留的样品和流动相。如果使用了缓冲盐,应先用高比例水相冲洗系统,确保缓冲盐完全清除,防止盐结晶堵塞流路。
泵的维护:定期检查泵的密封性能,如有泄漏应及时更换密封件。泵的活塞和密封圈需要定期清洗和润滑,以保证泵的正常运行。
检测器维护:根据检测器的类型进行相应的维护。如紫外检测器,需定期清洗流通池,检查灯的寿命,及时更换老化的灯。
高效液相色谱仪的使用和维护需要严格按照操作规程进行,定期进行检查和保养,及时处理出现的问题,以确保仪器的性能和分析结果的可靠性。
 
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